IFN-γRβ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402794-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IFN-γRβO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IFN-γRβ (h) e o Plasmídeo Double Nickase IFN-γRβ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IFNGR2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IFN-γRβ Anticorpo (A-11): sc-377291
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IFN-γRβ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402794-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IFN-γRβ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402794-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O receptor 2 do interferão gama (IFNGR2) codifica a IFN-γRβ, a subunidade acessória de sinalização do complexo recetor do interferão tipo II, que atua em conjunto com a IFNGR1 para mediar as respostas celulares ao interferão-γ. Após a ligação do ligando, a IFN-γRβ sustenta a ativação do eixo JAK1/JAK2–STAT1, promovendo programas transcricionais dependentes de STAT1 que moldam a apresentação de antigénios, a ativação de macrófagos e a imunidade antimicrobiana. A função do IFNGR2 influencia a comunicação cruzada com vias inflamatórias e de regulação imunitária mais amplas, incluindo redes de genes estimulados por interferão e circuitos de sinalização de citocinas. Perturbações genéticas ou funcionais do IFNGR2 estão associadas a uma resposta deficiente ao IFN-γ e a suscetibilidade a infeções graves, tornando-o um alvo-chave para dissecar mecanismos de defesa do hospedeiro e de desregulação imunitária.
IFN-γRβ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IFNGR2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IFNGR2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IFNGR2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IFNGR2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.