Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
IFN-γRβ CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-402794
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- IFN-γRβ CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在IFN-γRβ基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：IFN-γRβ: sc-377291，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
IFN-γRβ CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-402794 | 20 µg | $397.00 |
概述
IFNGR2 编码干扰素γ受体β链（IFN-γRβ），这是一种关键的共受体，与 IFNGR1 配对，在细胞表面形成具有功能的 IFN-γ 受体复合体。IFN-γ 结合后，IFN-γRβ 促进 JAK1/JAK2 的激活及其下游 STAT1 信号传导，进而驱动与抗原加工与呈递、巨噬细胞激活以及抗微生物免疫相关的转录程序。该通路与更广泛的先天与适应性免疫网络相互联通，塑造炎症反应与免疫监视。IFNGR2 的遗传或功能性破坏与 IFN-γ 应答受损及对严重感染的易感性相关，而其信号动力学的改变也与免疫失衡及肿瘤—免疫相互作用研究密切相关。
IFN-γRβ CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中IFNGR2基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对IFNGR2基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏IFNGR2开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使IFN-γRβ蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建IFNGR2缺失的细胞模型，用于IFN-γRβ信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 IFN-γRβ 功能至关重要的 IFNGR2 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 IFNGR2 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 IFN-γRβ CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 IFN-γRβ CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 IFNGR2 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 IFN-γRβ HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 IFN-γRβ HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由IFNGR2同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定IFNGR2靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。