IFN-α6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421043
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IFN-α6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IFN-α6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IFN-α6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421043 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Ifna6 de camundongo codifica o interferon-α6 (IFN-α6), um interferon do tipo I que inicia programas antivirais e imunomoduladores em resposta a sinais associados a patógenos e a danos. O IFN-α6 interage com o IFNAR para ativar a via de sinalização JAK–STAT, induzindo genes estimulados por interferon que regulam a defesa imune inata, a apresentação de antígenos e redes de citocinas. Essa via molda desfechos celulares como controle da proliferação e apoptose e se cruza com a sinalização de receptores de reconhecimento de padrões, incluindo as vias de RIG-I/MDA5 e TLR. A sinalização desregulada de interferon do tipo I está implicada na suscetibilidade a infecções virais e em fenótipos crônicos inflamatórios e semelhantes a autoimunes, tornando o Ifna6 relevante para estudos mecanísticos de patologia impulsionada por interferon.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IFN-α6 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ifna6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ifna6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ifna6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IFN-α6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ifna6 para a investigação da sinalização de IFN-α6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ifna6 críticos para a função IFN-α6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ifna6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IFN-α6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IFN-α6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ifna6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IFN-α6 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IFN-α6 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ifna6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ifna6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.