Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) IFITM3: sc-403281-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)IFITM3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IFITM3 (h) y el plásmido de doble nickasa IFITM3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a IFITM3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IFITM3 Anticuerpo (F-41): sc-100768
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) IFITM3 | sc-403281-NIC | 20 µg | $410.00 |
IFITM3 (proteína transmembrana 3 inducida por interferón) es una proteína de membrana endolisosomal estimulada por interferón que restringe la entrada de virus envueltos al limitar la fusión de membranas y modular el tráfico endocítico. Su expresión está regulada por la señalización de interferón de tipo I/II y contribuye a los programas de defensa inmunitaria innata que remodelan la composición de las membranas y la dinámica vesicular durante la infección. IFITM3 también se ha vinculado a respuestas inflamatorias y se ha estudiado por sus posibles funciones en la señalización de células inmunitarias, las respuestas al estrés y la biología tumoral a través de efectos sobre la organización de membrana y el tráfico de receptores. Las diferencias genéticas y de expresión en IFITM3 se han asociado con la variabilidad en la susceptibilidad y la gravedad de los fenotipos de infección viral, lo que respalda su relevancia en la investigación de las interacciones huésped–patógeno.
IFITM3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IFITM3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IFITM3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IFITM3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IFITM3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.