Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Iba1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419058
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Iba1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Iba1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Iba1 Anticorpo (1022-5): sc-32725
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Iba1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419058 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Aif1 codifica a molécula adaptadora de ligação ao cálcio ionizado 1 (Iba1), uma proteína citosólica do tipo EF-hand altamente enriquecida em micróglia e em outras células da linhagem mieloide. A Iba1 participa da remodelação do citoesqueleto de actina, da formação de ondulações de membrana (membrane ruffling) e da fagocitose, sustentando a vigilância imune inata e programas de sinalização inflamatória no sistema nervoso central. Por meio de interações que influenciam a motilidade dependente de Rac/Rho e respostas à dinâmica de cálcio, a Iba1 contribui para estados de ativação microglial e respostas a lesão tecidual. A expressão alterada de Aif1/Iba1 é amplamente utilizada como marcador de neuroinflamação e tem sido associada a fenótipos microgliais patológicos em modelos de doenças neurodegenerativas e neuroimunes.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Iba1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Aif1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Aif1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Aif1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Iba1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Aif1 para a investigação da sinalização de Iba1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Aif1 críticos para a função Iba1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Aif1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Iba1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Iba1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Aif1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Iba1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Iba1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Aif1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Aif1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.