Date published: 2026-7-11

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HtrA4双切口酶质粒(h): sc-410377-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • HtrA4 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • HtrA4双切酶质粒(h)和HtrA4双切酶质粒(h2)编码针对HTRA4的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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    产品名称产品编号规格价格数量收藏夹

    HtrA4双切口酶质粒(h)

    sc-410377-NIC
    20 µg
    $410.00

    HtrA4双切口酶质粒(h2)

    sc-410377-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    HTRA4 编码 HtrA4 蛋白,这是一种 HtrA 家族的分泌型丝氨酸蛋白酶,可通过切割错误折叠或受损蛋白参与细胞外蛋白质质量控制,并调节细胞–基质相互作用。HtrA4 通过对特定底物的蛋白水解作用,能够影响应激响应信号传导、炎症级联反应以及塑造组织稳态的重塑过程。已有报道显示,HTRA4 表达改变与胎盘生物学和血管功能等情境相关;而细胞外蛋白酶活性的失衡也与异常蛋白稳态及微环境重塑所关联的疾病机制密切相关。这些特性使 HtrA4 成为研究分泌型蛋白酶如何在人类细胞系统中调控信号与结构动态的有用靶点。

    HtrA4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HTRA4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HTRA4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HTRA4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HTRA4基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。