HSPA8/HSC70 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-418508-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- HSPA8/HSC70 as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- HSPA8/HSC70 As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo HSPA8/HSC70 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo HSPA8/HSC70 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor HSPA8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: HSPA8/HSC70 Anticorpo (B-6): sc-7298
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HSPA8/HSC70 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-418508-LAC | 200 µl | $455.00 |
HSPA8 (HSC70) codifica uma chaperona da família HSP70 expressa constitutivamente, que sustenta a proteostase ao regular o dobramento e o redobramento de proteínas dependentes de ATP, bem como a prevenção da agregação. A HSC70 coordena a autofagia mediada por chaperonas por meio do direcionamento lisossomal de substratos com motivo KFERQ, participa da endocitose mediada por clatrina e auxilia na maturação e no tráfego de proteínas de sinalização. Por meio de interações com co-chaperonas e com o sistema ubiquitina–proteassoma, influencia respostas ao estresse, a dinâmica do citoesqueleto e o controle de qualidade de organelas. A desregulação de redes de chaperonas ligadas à HSPA8 tem sido associada à neurodegeneração, a programas de sobrevivência de células cancerosas e a interações hospedeiro–patógeno, tornando-a um nó útil para estudos funcionais focados em vias.
As Partículas de Ativação Lentivirais HSPA8/HSC70 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de HSPA8 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais HSPA8/HSC70 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição HSPA8, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de HSPA8/HSC70. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo HSPA8 e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.