HSP 78 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-413434

개요

CLPB는 인간 미토콘드리아 AAA+ 샤페론 HSP78을 암호화합니다. HSP78은 단백질 응집을 해리하는 디스어그리게이스로, 미토콘드리아 HSP70/HSP60 시스템과 협력하여 기질(matrix) 내에서 잘못 접히거나 응집된 단백질을 추출하고 다시 접히도록(refolding) 돕습니다. CLPB는 ATP 의존적인 단백질 복합체 재구성을 통해 미토콘드리아 단백질 항상성(proteostasis), 호흡사슬의 무결성, 그리고 단백질 독성 및 산화 스트레스에 대한 세포 적응을 지원합니다. CLPB 관련 기능 이상은 미토콘드리아 질환 표현형 및 변화된 대사 항상성과 연관되어 왔으며, 이는 에너지 생산, 스트레스 반응, 품질 관리(quality control)를 조절하는 경로에서 CLPB의 중요성을 시사합니다. 미토콘드리아 단백질 감시 체계의 한 축으로서 HSP78은 산화적 인산화 장애, 산화환원(redox) 불균형, 스트레스 유발 아폽토시스 신호와 관련된 맥락에서 자주 연구됩니다.

HSP 78 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CLPB 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CLPB 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CLPB의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HSP 78 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HSP 78 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CLPB 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HSP 78 기능에 중요한 CLPB 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CLPB 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HSP 78 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 HSP 78 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CLPB 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HSP 78 HDR 플라스미드 (h) 및 HSP 78 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CLPB 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CLPB 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.