HSP 40 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-402810

概述

DNAJB1 编码人源 HSP40 共伴侣蛋白（DnaJ 同源蛋白 B 亚家族成员 1）。它是蛋白质稳态（proteostasis）的关键调控因子，可刺激 HSP70 的 ATP 酶活性，促进客户蛋白的折叠、再折叠以及对错误折叠蛋白的分流处理。HSP40 通过其 J 结构域依赖的方式与 HSP70 相互作用，支持细胞质蛋白质质量控制与应激反应，并协调通过蛋白酶体及自噬相关通路进行的伴侣蛋白辅助降解。DNAJB1 的功能与细胞在热休克及其他蛋白毒性应激下的抗逆性密切相关；而伴侣网络的异常也常与蛋白聚集性疾病及肿瘤相关的应激适应有关。与 DNAJB1 相关的一个反复出现的疾病事件是纤维板层型肝癌中观察到的 DNAJB1–PRKACA 融合，这也凸显了在明确遗传背景下，构建以 DNAJB1 为核心的模型对于研究伴侣蛋白生物学的价值。

HSP 40 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中DNAJB1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对DNAJB1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏DNAJB1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使HSP 40蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建DNAJB1缺失的细胞模型，用于HSP 40信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 HSP 40 功能至关重要的 DNAJB1 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 DNAJB1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 HSP 40 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 HSP 40 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 DNAJB1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 HSP 40 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 HSP 40 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由DNAJB1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定DNAJB1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。