HSFY1 Plasmide Double Nickase (h): sc-417414-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HSFY1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HSFY1 Double Nickase Plasmid (h) e il HSFY1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HSFY1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HSFY1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-417414-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSFY1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-417414-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSFY1 (heat shock transcription factor, Y-linked 1) codifica un membro della famiglia dei fattori heat shock associato al cromosoma Y, implicato in programmi di regolazione trascrizionale che supportano la proteostasi cellulare. Sebbene sia meno caratterizzato rispetto agli HSF canonici, HSFY1 è stato collegato all’espressione genica responsiva allo stress, all’omeostasi del ripiegamento proteico e alle vie di controllo qualità che coordinano le reti di chaperoni e l’adattamento a condizioni proteotossiche. L’espressione e la variabilità genetica di HSFY1 sono state studiate nel contesto della biologia della linea germinale maschile, con associazioni riportate con spermatogenesi compromessa e fenotipi di infertilità legati al cromosoma Y. In quanto regolatore trascrizionale, HSFY1 rappresenta un punto di ingresso maneggevole per analizzare come fattori regolatori legati al sesso modulino la segnalazione dello stress e lo stato delle cellule riproduttive.
HSFY1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HSFY1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HSFY1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HSFY1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HSFY1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.