HSF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-400432-KO-2

Visão geral

O fator de choque térmico 1 (HSF1) é um regulador transcricional mestre que coordena a resposta celular ao choque térmico ao induzir chaperonas e genes de proteostase, incluindo membros das famílias HSP70 e HSP90, para preservar o dobramento de proteínas e limitar o estresse proteotóxico. Além da adaptação ao estresse agudo, o HSF1 integra sinais provenientes da função do proteassoma, da tradução e do estado metabólico para influenciar o controle de qualidade proteica, a organização do citoesqueleto e programas de sobrevivência celular. A atividade do HSF1 se cruza com vias como a estabilização de clientes dependente de HSP90, a autofagia e a dinâmica de grânulos de estresse, moldando a forma como as células respondem a estressores ambientais e intracelulares. A desregulação da sinalização de HSF1 tem sido implicada na transformação maligna e na manutenção tumoral, assim como na neurodegeneração e em outros distúrbios associados ao mau dobramento de proteínas, tornando-o um alvo amplamente utilizado em estudos mecanísticos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HSF1 (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HSF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HSF1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HSF1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HSF1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HSF1 para a investigação da sinalização de HSF1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HSF1 críticos para a função HSF1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HSF1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo HSF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HSF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HSF1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo HSF1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HSF1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HSF1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HSF1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.