HSBP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416835-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HSBP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HSBP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HSBP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HSBP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HSBP1 Anticorpo (2C3): sc-517153
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HSBP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416835-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSBP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-416835-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A HSBP1 (proteína 1 de ligação ao fator de choque térmico, heat shock factor binding protein 1) humana é uma pequena proteína reguladora do tipo coiled-coil que se liga ao fator de choque térmico 1 (HSF1) e modula a resposta ao choque térmico ao atenuar a trimerização e a atividade transcricional do HSF1. Por meio desse controle por feedback, a HSBP1 ajuda a moldar programas de proteostase que envolvem chaperonas moleculares e a expressão gênica induzida por estresse, influenciando a tolerância celular ao estresse térmico, oxidativo e proteotóxico. A regulação associada à HSBP1 interage com vias que governam o controle de qualidade de proteínas, a progressão do ciclo celular e a sinalização adaptativa ao estresse. A sinalização de choque térmico desregulada e as redes de chaperonas são frequentemente implicadas na biologia do câncer, na neurodegeneração e em outros distúrbios caracterizados por mau dobramento proteico, tornando a HSBP1 um nó útil para estudos mecanísticos dos circuitos de resposta ao estresse.
HSBP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HSBP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HSBP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HSBP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HSBP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.