HS3ST4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-408176
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HS3ST4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HS3ST4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HS3ST4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-408176 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
HS3ST4 codifica a heparan sulfato–glicosamina 3-O-sulfotransferase 4, uma enzima residente no Golgi que catalisa a 3-O-sulfatação durante a biossíntese de proteoglicanos de heparan sulfato (HSPG). Essa modificação tardia ajuda a definir a estrutura fina do heparan sulfato e modula a ligação de ligantes extracelulares, moldando vias de sinalização como FGF, VEGF, WNT e processos guiados por quimiocinas que influenciam adesão, migração e diferenciação. Ao alterar interações receptor–ligante dependentes de HSPG e a organização da matriz extracelular, HS3ST4 pode afetar a comunicação célula–célula e sinais do microambiente relevantes para programas de desenvolvimento e fenótipos associados a tumores. Padrões desregulados de sulfatação do heparan sulfato, incluindo alterações na capacidade de 3-O-sulfatação, são frequentemente investigados em estudos de biologia do câncer, inflamação e remodelamento tecidual.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HS3ST4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HS3ST4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HS3ST4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HS3ST4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HS3ST4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HS3ST4 para a investigação da sinalização de HS3ST4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HS3ST4 críticos para a função HS3ST4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HS3ST4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HS3ST4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HS3ST4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HS3ST4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HS3ST4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HS3ST4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HS3ST4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HS3ST4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.