Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Hrs Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401501-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HrsO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Hrs (h) e o Plasmídeo Double Nickase Hrs (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HGS. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Hrs Anticorpo (C-7): sc-271455
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Hrs Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401501-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Hrs Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401501-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O HGS humano codifica o substrato da tirosina quinase regulado pelo fator de crescimento de hepatócitos (Hrs), um componente do ESCRT-0 que inicia a triagem endossomal de proteínas de membrana ubiquitinadas. O Hrs liga-se ao fosfatidilinositol 3-fosfato em endossomos precoces e coordena o reconhecimento de carga com os complexos ESCRT-I/II/III para promover a formação de corpos multivesiculares, a degradação lisossomal e a atenuação da sinalização de receptores. Por meio dessas atividades, o Hrs influencia o controle, dependente de endocitose, de vias como o EGFR e outras redes de receptores tirosina quinase, afetando a duração do sinal e a homeostase celular. A desregulação do tráfego endossomal e da renovação de receptores associada a alterações na função de HGS/Hrs tem sido ligada a contextos relevantes para a biologia do câncer e mecanismos de doenças neurodegenerativas, tornando-o um nó útil para o estudo de proteostase e adaptação de sinalização.
Hrs O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HGS em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HGS. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HGS. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HGS interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.