Plásmido Doble Nickase (h) HoxC6: sc-403393-NIC

HOXC6 codifica el factor de transcripción homeobox HoxC6, un regulador de unión al ADN específico de secuencia que coordina la organización anteroposterior y la especificación de linajes durante el desarrollo. En células humanas, HoxC6 modula programas transcripcionales vinculados a decisiones de destino celular, diferenciación y morfogénesis tisular al integrarse con redes reguladoras HOX más amplias y con el control de la expresión génica mediado por la cromatina. La expresión desregulada de HOXC6 se ha asociado con estados de diferenciación alterados y con la reprogramación transcripcional observada en múltiples tipos de tumores, lo que respalda su relevancia en estudios sobre señalización oncogénica y desregulación de redes génicas del desarrollo. Como factor de transcripción nuclear, HoxC6 se investiga con frecuencia en contextos como la dinámica epitelio-mesenquimal, el control de la proliferación y los fenotipos tipo madre, a través de la regulación de genes diana aguas abajo.

HoxC6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HOXC6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HOXC6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HOXC6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HOXC6 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.