HoxB4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404013
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HoxB4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HoxB4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HoxB4 Anticorpo (D-1): sc-365927
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HoxB4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404013 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
HOXB4 codifica o fator de transcrição homeobox HoxB4, um regulador de ligação ao DNA específico de sequência que ajuda a estabelecer o padrão ântero‑posterior durante o desenvolvimento e controla programas de especificação de linhagem em compartimentos hematopoéticos e em outros compartimentos de progenitores. A atividade de HoxB4 coordena redes transcricionais que governam a autorrenovação de células‑tronco/progenitoras, o timing da diferenciação e a progressão do ciclo celular, integrando-se a vias mais amplas de sinalização do desenvolvimento e de regulação da cromatina. A expressão desregulada de HOXB4 foi relatada em contextos de neoplasias hematológicas e é frequentemente estudada como parte da circuitaria regulatória do cluster HOX, da arquitetura enhancer–promotor e do controle epigenético da identidade celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HoxB4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HOXB4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HOXB4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HOXB4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HoxB4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HOXB4 para a investigação da sinalização de HoxB4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HOXB4 críticos para a função HoxB4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HOXB4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HoxB4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HoxB4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HOXB4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HoxB4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HoxB4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HOXB4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HOXB4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.