HoxA3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404634

Visão geral

HOXA3 codifica o fator de transcrição homeobox HoxA3, um regulador de ligação ao DNA específico de sequência que estabelece a identidade ântero-posterior durante a embriogênese e coordena programas que governam a morfogênese, a diferenciação epitelial e o remodelamento tecidual. O HoxA3 integra-se às redes regulatórias do cluster HOX e interage com vias de sinalização do desenvolvimento, como WNT, BMP/TGF-β e ácido retinoico, para moldar decisões de destino celular e a expressão gênica espacial. Em contextos adultos, a alteração da expressão de HOXA3 ou a desregulação epigenética tem sido associada a estados de diferenciação aberrantes e a um “reprogramamento” transcricional observado no câncer e em outros distúrbios que envolvem a reativação de genes do desenvolvimento. Como regulador nuclear, o HoxA3 é frequentemente estudado no mapeamento de redes de regulação gênica, em modelos de especificação de linhagem e no controle da transcrição mediado pela cromatina.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HoxA3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HOXA3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HOXA3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HOXA3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HoxA3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HOXA3 para a investigação da sinalização de HoxA3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HOXA3 críticos para a função HoxA3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HOXA3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo HoxA3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HoxA3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HOXA3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo HoxA3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HoxA3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HOXA3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HOXA3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.