Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
HoxA10 Double Nickaseプラスミド (h): sc-401463-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- HoxA10 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- HoxA10ダブルニカースプラスミド（h）およびHoxA10ダブルニカースプラスミド（h2）は、HOXA10を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: HoxA10 抗体 (E-11): sc-271428
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
HoxA10 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401463-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HoxA10 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-401463-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXA10は、ホメオボックス型転写因子HoxA10をコードしており、配列特異的にDNAへ結合する制御因子として、系譜決定に関わる遺伝子ネットワークを制御することで、胚発生におけるパターニングおよび成体組織の恒常性維持を統括します。造血系および間葉系の文脈では、HoxA10は発生シグナル伝達プログラムを統合し、増殖・分化・接着・細胞外マトリックスのリモデリングを調節し、その下流で細胞周期や転写制御経路に影響を及ぼします。HOXA10の発現異常や制御回路の改変は、骨髄系の成熟異常や、悪性腫瘍関連状態でみられるより広範な転写リプログラミングと関連づけられており、疾患関連モデルにおける発生遺伝子制御の研究に有用な結節点となります。生殖生物学の分野では、HOXA10は子宮内膜の分化および子宮受容能プログラムに寄与し、ホルモン応答性の転写ネットワークに関する研究を支えます。
HoxA10 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における HOXA10 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、HOXA10内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、HOXA10の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、HOXA10が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。