HN1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-412133-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HN1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HN1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HN1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HN1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HN1 Anticorpo (3G6): sc-517032
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HN1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-412133-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HN1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-412133-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HN1 (hematological and neurological expressed 1) codifica uma pequena proteína conservada implicada na regulação da proliferação celular e dos programas de diferenciação, com expressão dinâmica durante o desenvolvimento e em tecidos em regeneração. Em células humanas, a abundância de HN1 tem sido associada ao controle do ciclo celular e a estados transcricionais adaptativos ao estresse, sendo frequentemente estudada no contexto de redes de sinalização que influenciam o crescimento e a plasticidade de linhagem. Alterações na expressão de HN1 foram relatadas em múltiplos tipos tumorais, nos quais é usada como correlato molecular de fenótipos agressivos e de remodelação de vias proliferativas. Essas características tornam a HN1 um alvo útil para estudos mecanísticos de controle do crescimento, alternância fenotípica e regulação gênica dependente do contexto.
HN1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HN1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HN1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HN1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.