HIV Tat-SF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404479

Visão geral

HTATSF1 codifica o fator 1 específico do Tat do HIV (HIV Tat-SF1), uma proteína nuclear de ligação a RNA que atua como cofator transcricional e regulador do processamento do pré‑mRNA. O HIV Tat-SF1 tem sido associado à coordenação da transcrição pela RNA polimerase II com a atividade do spliceossomo, influenciando o splicing alternativo e a maturação do mRNA em diversos programas gênicos. Por meio dessas funções no processamento de RNA co-transcricional, o HTATSF1 contribui para a homeostase celular e tem sido estudado no contexto de interações hospedeiro–vírus que dependem de controle preciso da transcrição e do metabolismo de RNA. A desregulação de fatores de splicing acoplados à transcrição é amplamente relevante para alterações, associadas a doenças, em redes de expressão gênica e em fenótipos de processamento de RNA.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HIV Tat-SF1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HTATSF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HTATSF1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HTATSF1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HIV Tat-SF1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HTATSF1 para a investigação da sinalização de HIV Tat-SF1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HTATSF1 críticos para a função HIV Tat-SF1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HTATSF1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo HIV Tat-SF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HIV Tat-SF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HTATSF1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo HIV Tat-SF1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HIV Tat-SF1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HTATSF1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HTATSF1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.