Histone Deacetylase 6 (HDAC6) Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400314-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Histone Deacetylase 6 (HDAC6)O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Histone Deacetylase 6 (HDAC6) (h) e o Plasmídeo Double Nickase Histone Deacetylase 6 (HDAC6) (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HDAC6. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Histone Deacetylase 6 Anticorpo (D-11): sc-28386
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Histone Deacetylase 6 (HDAC6) Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400314-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Histone Deacetylase 6 (HDAC6) Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400314-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HDAC6 codifica a Histona Desacetilase 6, uma desacetilase de lisina predominantemente citoplasmática que regula a proteostase e a dinâmica do citoesqueleto ao desacetilar substratos não histónicos como a α-tubulina, a HSP90 e a cortactina. Por meio dessas atividades, a HDAC6 influencia o transporte dependente de microtúbulos, a formação de agressoomas, as vias autofagia–lisossoma, as respostas ao stress e a motilidade celular. A HDAC6 também interage com o controlo de qualidade dependente de ubiquitina por meio do seu domínio de ligação à ubiquitina, ligando a agregação de proteínas aos mecanismos de depuração. A desregulação da sinalização de HDAC6 tem sido associada à neurodegeneração, à invasão de células tumorais e a fenótipos inflamatórios, o que a torna um alvo amplamente estudado em vias reguladas por acetilação.
Histone Deacetylase 6 (HDAC6) O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HDAC6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HDAC6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HDAC6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HDAC6 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.