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Histone Deacetylase 4 (HDAC4)CRISPR激活质粒(h) | sc-400388-ACT | 20 µg | $397.00 |
HDAC4 编码组蛋白去乙酰化酶 4(Histone Deacetylase 4),属于 IIa 类 HDAC,是一种对信号刺激作出响应的染色质调控因子,可将细胞外线索连接到转录程序。HDAC4 会在钙/钙调蛋白依赖性激酶及其他信号输入的作用下在细胞质与细胞核之间穿梭;在细胞核内,它调节组蛋白乙酰化状态,并且部分通过与 MEF2 等转录因子相互作用来抑制转录。通过这些机制,HDAC4 参与细胞分化、神经元与肌肉基因表达、应激反应以及表观遗传重塑的调控。HDAC4 活性或定位的失调与多种病理性转录状态相关,涉及神经发育与神经退行性过程、心脏重塑以及癌症相关的基因表达改变。
Histone Deacetylase 4 (HDAC4) CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性HDAC4的表达。
Histone Deacetylase 4 (HDAC4) CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的HDAC4基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于HDAC4转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Histone Deacetylase 4 (HDAC4)表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的HDAC4位点,并能够研究内源性位点上依赖于Histone Deacetylase 4 (HDAC4)的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在HDAC4表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Histone Deacetylase 4 (HDAC4)通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。