Histone Deacetylase 11 (HDAC11) Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-402103-LAC

HDAC11 codifica a Histona Desacetilase 11, a única desacetilase de histonas da classe IV, que regula a acessibilidade da cromatina e programas transcricionais por meio da desacetilação de lisina, incluindo atividades de desacetilação e remoção de acilações lipídicas (defatty-acylation). Ao moldar estados epigenéticos, a HDAC11 influencia a diferenciação de células imunes e a sinalização inflamatória, afetando vias que controlam a expressão de citocinas, a apresentação de antígenos e a adaptação metabólica. Alterações na expressão ou na atividade de HDAC11 têm sido associadas a respostas imunes desreguladas e a estados transcricionais oncogênicos, sustentando sua investigação em imunologia, biologia hematológica e epigenética tumoral. Essas funções tornam a HDAC11 um ponto útil para explorar como enzimas epigenéticas coordenam redes de expressão gênica que governam proliferação, diferenciação e respostas ao estresse.

As Partículas de Ativação Lentivirais Histone Deacetylase 11 (HDAC11) (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de HDAC11 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Histone Deacetylase 11 (HDAC11) (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição HDAC11, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Histone Deacetylase 11 (HDAC11). A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo HDAC11 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.