Histone Deacetylase 10 (HDAC10) Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403221-NIC

HDAC10 codifica a Histona Desacetilase 10, uma desacetilase de histonas dependente de zinco que modula a acessibilidade da cromatina e programas transcricionais ao remover grupos acetil de histonas e de outros substratos proteicos. Como uma desacetilase de classe II com funções citoplasmáticas proeminentes, a HDAC10 tem sido associada à regulação da autofagia, às respostas a danos no DNA e à adaptação ao estresse celular, influenciando vias que controlam a proliferação e a sobrevivência. Alterações na expressão ou na atividade da HDAC10 têm sido associadas a mudanças no estado epigenético e em redes de sinalização relacionadas ao metabolismo e ao sistema imune observadas em diversos contextos de doença, incluindo a biologia do câncer e processos neuroinflamatórios. Essas funções tornam a HDAC10 um alvo útil para dissecar o controle epigenético da expressão gênica e seus fenótipos a jusante em modelos de células humanas.

Histone Deacetylase 10 (HDAC10) O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HDAC10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HDAC10. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HDAC10. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HDAC10 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.