Histamine H2 Receptor Double Nickaseプラスミド (h): sc-401935-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Histamine H2 Receptor Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Histamine H2 Receptorダブルニカースプラスミド（h）およびHistamine H2 Receptorダブルニカースプラスミド（h2）は、HRH2を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Histamine H2 Receptor Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401935-NIC | 20 µg | $410.00 |
HRH2はヒスタミンH2受容体をコードしており、主にGsに共役するGタンパク質共役型受容体（GPCR）です。アデニリルシクラーゼを刺激してcAMPを増加させ、PKA依存的なシグナル伝達を活性化します。上皮系および免疫系の文脈では、HRH2シグナルは分泌、バリア機能、生理状態、ならびに炎症の基調（炎症トーン）を調節し、遺伝子発現や細胞代謝に影響するセカンドメッセンジャー・ネットワークと統合的に働きます。消化管および呼吸器組織におけるヒスタミン駆動性の細胞間コミュニケーションの一部として、HRH2は粘膜恒常性や制御不全に陥った炎症性微小環境との関連でしばしば研究されています。受容体シグナルの動態変化は、神経免疫クロストークや腫瘍関連シグナル伝達経路の研究においても重要であり、cAMP依存的なプログラムが細胞の挙動を再構築し得る点が注目されています。
Histamine H2 Receptor ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における HRH2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、HRH2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、HRH2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、HRH2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。