非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
HIF PHD3 抗体 (EG188e/d5): sc-517601. 未经处理 (A) 和经 CoCl2 处理 (B) 的 HepG2 全细胞裂解液中 HIF PHD3 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
HIF PHD3 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-403671
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- HIF PHD3 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在HIF PHD3基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：HIF PHD3: sc-517601，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
HIF PHD3 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-403671 | 20 µg | $397.00 |
概述
EGLN3 编码缺氧诱导因子（HIF）的脯氨酰羟化酶 3（PHD3）。PHD3 是一种氧感应型双加氧酶，在依赖氧气和 2-氧代戊二酸（2-oxoglutarate）的条件下对 HIF-α 亚基进行羟化，从而促进 VHL 介导的泛素化并经蛋白酶体降解。通过这一经典的缺氧通路，PHD3 帮助在氧张力波动时精细调控转录程序，这些程序涉及血管生成、糖酵解代谢、红细胞生成以及细胞存活。EGLN3 的活性还与线粒体代谢及活性氧（ROS）信号相交汇，将营养状态与氧可用性联系起来，驱动适应性基因表达。EGLN3/PHD3 的表达或功能失调与肿瘤生物学中的异常缺氧反应、缺血相关的细胞应激以及神经内分泌肿瘤等情境有关，因此可作为缺氧研究中的一个关键机制节点。
HIF PHD3 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中EGLN3基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对EGLN3基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏EGLN3开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使HIF PHD3蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建EGLN3缺失的细胞模型，用于HIF PHD3信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 HIF PHD3 功能至关重要的 EGLN3 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 EGLN3 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 HIF PHD3 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 HIF PHD3 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 EGLN3 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 HIF PHD3 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 HIF PHD3 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由EGLN3同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定EGLN3靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。