Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Hhip Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420853
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Hhip O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Hhip, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Hhip Anticorpo (5D11): sc-293265
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Hhip Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420853 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A proteína Hhip (hedgehog-interacting protein) de camundongo codifica um antagonista associado à membrana da sinalização Hedgehog, que se liga aos ligantes Hedgehog e limita a ativação da via. Ao modular a disponibilidade de ligantes, Hhip contribui para o controle do padrão de desenvolvimento, da homeostase tecidual e das interações epitélio–mesênquima a jusante de programas transcricionais Sonic Hedgehog–GLI. Alterações na expressão ou na regulação de Hhip têm sido associadas a uma saída desregulada da via Hedgehog, implicada em malformações congênitas e em diversos estados fisiopatológicos, incluindo crescimento aberrante e remodelamento fibrótico. Como um “freio” da via, Hhip é frequentemente estudada em contextos em que a sinalização Hedgehog influencia decisões de destino celular, proliferação e diferenciação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Hhip (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Hhip em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Hhip, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Hhip na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Hhip.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Hhip para a investigação da sinalização de Hhip, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Hhip críticos para a função Hhip
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Hhip para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Hhip Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Hhip Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Hhip. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Hhip Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Hhip (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Hhip para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Hhip definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.