HGFA Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404422-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HGFAO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HGFA (h) e o Plasmídeo Double Nickase HGFA (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HGFAC. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HGFA Anticorpo (B-6): sc-515126
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HGFA Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404422-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HGFA Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404422-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HGFAC codifica o ativador do fator de crescimento de hepatócitos (HGFA), uma serinoprotease secretada que converte o pro-HGF de cadeia única em HGF ativo, potencializando assim a sinalização do receptor MET. Essa etapa proteolítica conecta redes de proteases extracelulares a vias a jusante que controlam interações epitélio–mesênquima, motilidade celular, proliferação e remodelamento tecidual, com comunicação cruzada com cascatas associadas à coagulação e à fibrinólise. A atividade desregulada do eixo HGF/HGFA–MET tem sido implicada em sinalização estroma–epitélio anormal, programas de crescimento invasivo e respostas regenerativas alteradas, tornando o HGFAC um alvo útil para estudos mecanísticos de proteólise pericelular e ativação de fatores de crescimento em células humanas.
HGFA O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HGFAC em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HGFAC. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HGFAC. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HGFAC interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.