HES2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407494

Visão geral

HES2 codifica um repressor transcricional do tipo hélice-alça-hélice básica (bHLH) da família Hairy/Enhancer-of-split, que modula programas de expressão gênica responsáveis por controlar decisões de destino celular. Como efetor a jusante da sinalização Notch, HES2 contribui para redes de retroalimentação transcricional que restringem a diferenciação e ajudam a coordenar o timing do desenvolvimento, atuando frequentemente por meio de repressão ligada a promotores e de interação com complexos correpressores. Ao influenciar o compromisso de linhagem e o equilíbrio entre proliferação e diferenciação, alterações na atividade de HES2 são relevantes para estudos de distúrbios do desenvolvimento e de desregulação, associada ao câncer, da circuitaria transcricional dependente de Notch. In vitro, a perturbação de HES2 é comumente usada para investigar o controle transcricional da manutenção de progenitores, programas neurogênicos e resultados de diferenciação específicos do contexto.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HES2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HES2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HES2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HES2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HES2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HES2 para a investigação da sinalização de HES2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HES2 críticos para a função HES2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HES2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo HES2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HES2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HES2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo HES2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HES2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HES2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HES2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.