Hemoglobin ε Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403392-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Hemoglobin εO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Hemoglobin ε (h) e o Plasmídeo Double Nickase Hemoglobin ε (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HBE1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Hemoglobin ε Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403392-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Hemoglobin ε Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403392-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HBE1 codifica a hemoglobina ε, uma cadeia de globina embrionária que forma tetrâmeros de hemoglobina funcionais com globinas do tipo α para sustentar o transporte de oxigênio durante o início do desenvolvimento humano. Sua expressão é rigidamente regulada dentro da região de controle do locus da β-globina e do programa de troca do desenvolvimento da hemoglobina, conectando o HBE1 à diferenciação eritroide e às vias de manejo de heme/ferro. A regulação alterada do cluster de globinas é relevante para hemoglobinopatias e estresse eritropoiético, nos quais padrões de expressão de globinas do desenvolvimento podem modular o equilíbrio entre as cadeias de globina. Como marcador de programas eritroides precoces, a hemoglobina ε é frequentemente usada para estudar o comprometimento de linhagem e o controle transcricional ao longo do cluster gênico da β-globina.
Hemoglobin ε O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HBE1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HBE1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HBE1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HBE1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.