HB9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420869

概要

Mnx1（HB9）は、腹側脊髄の発生および体性運動ニューロンの指定と成熟に必須なホメオボックス型転写因子をコードします。HB9は、系譜特異的遺伝子発現の制御を介して、ニューロン亜型の同一性、軸索ガイダンス、神経筋接続性を協調させる転写プログラムに関与します。膵臓においても、Mnx1は内分泌系譜の決定に寄与し、器官形成や細胞運命決定を形作る発生経路との関連が示されています。MNX1の発現や機能の変化は、運動ニューロン発生に関わる表現型と関連づけられており、先天性の神経系・膵臓発生異常の文脈や、がん生物学における系譜制御の破綻（ディスレギュレーション）の観点からも研究されています。

HB9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるMnx1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Mnx1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Mnx1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、HB9タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、HB9シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Mnx1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• HB9の機能に不可欠なMnx1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Mnx1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• HB9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびHB9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Mnx1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  HB9 HDRプラスミド（m）および HB9 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMnx1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMnx1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。