H2BFWT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407111

Visão geral

H2BFWT codifica um membro humano da família de histonas H2B que participa da organização dos nucleossomos e da arquitetura da cromatina em níveis superiores, influenciando assim a acessibilidade do genoma para transcrição, replicação e reparo do DNA. Como componente central da cromatina, H2BFWT ajuda a coordenar a regulação epigenética e processos dependentes de cromatina, como a progressão do ciclo celular e a manutenção da estabilidade genômica. Alterações na dosagem de histonas ou na composição da cromatina são frequentemente associadas a programas de expressão gênica desregulados e podem modular vias implicadas na oncogênese e em anomalias do desenvolvimento. Consequentemente, H2BFWT é relevante para estudos de dinâmica da cromatina, controle transcricional e respostas a danos no DNA em células humanas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO H2BFWT (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene H2BFWT em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do H2BFWT, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do H2BFWT na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína H2BFWT.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de H2BFWT para a investigação da sinalização de H2BFWT, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) H2BFWT críticos para a função H2BFWT
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos H2BFWT para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo H2BFWT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo H2BFWT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus H2BFWT. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo H2BFWT Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR H2BFWT (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia H2BFWT para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo H2BFWT definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.