G_{γ 10} Lentiviral Activation Particles (m2): sc-420613-LAC-2

マウスGng10は三量体Gタンパク質のγ10サブユニットをコードしており、GPCRシグナル伝達における膜係留型の構成要素としてGβサブユニットと会合してGβγ複合体を形成し、受容体依存的なシグナル伝播を制御する。GNG10を含む三量体に由来するGβγは、イオンチャネル、アデニリルシクラーゼ、ホスホリパーゼCβなどのエフェクターを調節し、神経興奮性、分泌、細胞骨格ダイナミクスを制御するセカンドメッセンジャー経路を形成する。Gタンパク質サブユニット構成やGβγシグナルの変化は、神経発達や感覚情報処理に関わる障害、ならびに細胞移動や増殖の制御異常を伴う病態に関与すると示唆されており、Gng10は機序解明研究の関連標的となる。マウスモデルにおけるGng10の遺伝子編集は、GPCRネットワークの経路解析、Gタンパク質複合体内のタンパク質間相互作用マッピング、さらに受容体入力を下流の転写学的・電気生理学的表現型へと結び付ける機能ゲノミクススクリーニングを支える。

Gγ 10 レンチウイルス活性化粒子（m2）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なGng10の発現上昇を可能にします。

Gγ 10 レンチウイルス活性化粒子（m2）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、Gng10転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性Gγ 10の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のGng10ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。