Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Gβ 5 (m): sc-420611
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Gβ 5 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Gβ 5, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Gβ 5 Antibody (C-6): sc-515379
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Gβ 5 (m) | sc-420611 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Gnb5 code la sous-unité Gβ5, un composant atypique des protéines G bêta qui forme des complexes obligatoires avec les protéines RGS de la famille R7 afin d’accélérer l’hydrolyse du GTP par Gα et de rendre plus précise la terminaison des signaux des GPCR. Dans les cellules de souris, les assemblages Gβ5–RGS régulent la cinétique et l’amplitude des voies de signalisation liées à l’AMPc et au Ca²⁺ en aval des récepteurs de neurotransmetteurs et des récepteurs sensoriels, modulant l’excitabilité neuronale et la transmission synaptique. En contrôlant des voies dépendantes des GPCR, Gβ5 influence des processus de signalisation à l’échelle des réseaux, notamment la neuromodulation et l’adaptation aux stimuli. Une dérégulation de la signalisation associée à GNB5 a été liée à des phénotypes neurodéveloppementaux et sensoriels, ce qui souligne sa pertinence pour les études mécanistiques sur la temporalité de la signalisation des GPCR et le fonctionnement des circuits neuronaux.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Gβ 5 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Gnb5 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Gnb5, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Gnb5 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Gβ 5.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Gnb5 pour l'étude de la signalisation de Gβ 5, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Gnb5 essentiels à la fonction de Gβ 5
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Gnb5 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Gβ 5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Gβ 5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Gnb5. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Gβ 5 plasmide HDR (m) et le Gβ 5 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Gnb5 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Gnb5 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.