Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Gα t1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401559-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Gα t1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Gα t1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Gα t1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GNAT1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Gα t1 Anticorpo (C-9): sc-518139
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Gα t1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401559-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Gα t1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401559-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GNAT1 codifica a subunidade alfa da transducina específica de bastonetes, Gαt1, uma proteína G heterotrimérica que acopla a rodopsina ativada à fosfodiesterase de cGMP (PDE6) durante a fototransdução. Após a estimulação luminosa, Gαt1 troca GDP por GTP e propaga a sinalização que reduz os níveis de cGMP, modula a atividade dos canais regulados por nucleótidos cíclicos e determina o potencial de membrana e a saída sináptica dos fotorreceptores. Esta cascata mediada por GPCR é rigorosamente regulada pela hidrólise de GTP e pela reassociação com as subunidades βγ, integrando a amplificação do sinal e a cinética de recuperação nos bastonetes da retina. A desregulação da sinalização dependente de GNAT1 tem sido associada a disfunções retinianas hereditárias, sustentando a sua utilização como alvo para estudos mecanísticos da sinalização visual e da fisiologia dos fotorreceptores.
Gα t1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GNAT1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GNAT1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GNAT1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GNAT1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.