GSK3 beta Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-425249-LAC

O gene **Gsk3b** em camundongos codifica a **glicogênio sintase quinase 3 beta (GSK3 beta)**, uma quinase de serina/treonina constitutivamente ativa que integra sinais das vias **PI3K–AKT**, **Wnt/β-catenina** e **mTOR** para regular a renovação de proteínas dependente de fosforilação e programas transcricionais. A GSK3 beta controla o metabolismo do glicogênio, a progressão do ciclo celular, a apoptose e a dinâmica do citoesqueleto, e modula a plasticidade neuronal por meio de efeitos sobre proteínas associadas a microtúbulos e a sinalização sináptica. Na sinalização canônica de Wnt, a GSK3 beta participa do complexo de destruição que fosforila a β-catenina, conectando o estímulo por ligante a alterações na expressão gênica. A atividade desregulada de **Gsk3b** está implicada em mecanismos relacionados à disfunção metabólica, inflamação, sinalização associada ao câncer e neurodegeneração, o que a torna um alvo frequente para dissecar vias em modelos murinos.

As Partículas de Ativação Lentivirais GSK3 beta (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Gsk3b numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais GSK3 beta (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Gsk3b, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de GSK3 beta. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Gsk3b e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.