GSK-3α Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400518-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GSK-3αO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GSK-3α (h) e o Plasmídeo Double Nickase GSK-3α (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GSK3A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GSK-3α Anticorpo (H-12): sc-5264
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GSK-3α Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400518-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GSK-3α Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400518-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GSK3A codifica a glicogênio sintase quinase-3 alfa (GSK-3α), uma quinase de serina/treonina constitutivamente ativa que integra sinais das vias Wnt/β-catenina, PI3K–AKT e insulina para regular o metabolismo do glicogênio, a progressão do ciclo celular e a apoptose. Ao fosforilar substratos como a β-catenina e diversos reguladores transcricionais, a GSK-3α influencia programas de expressão gênica que controlam a diferenciação e respostas celulares ao estresse. A atividade desregulada de GSK-3α e a sinalização a jusante têm sido associadas a proliferação alterada, homeostase metabólica e sinalização inflamatória em diversos contextos relevantes para doenças. Como um parálogo de GSK3B, o GSK3A é frequentemente estudado para elucidar funções específicas de isoformas em redes de sinalização e mecanismos compensatórios.
GSK-3α O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GSK3A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GSK3A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GSK3A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GSK3A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.