GRO1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420697-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GRO1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GRO1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase GRO1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Cxcl1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GRO1 Anticorpo (S-19): sc-80516
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GRO1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420697-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Cxcl1 de camundongo codifica a quimiocina GRO1 (também conhecida como KC), uma quimiocina CXC ELR+ secretada que se liga ao CXCR2 para promover a quimiotaxia, a adesão e a ativação de neutrófilos em locais de lesão tecidual ou infecção. A sinalização de GRO1 integra-se a redes de citocinas inflamatórias e a vias a jusante como NF-κB e MAPK para moldar o recrutamento de leucócitos, as respostas endoteliais e os gradientes locais de quimiocinas. A desregulação da expressão de Cxcl1 é comumente estudada em modelos de inflamação aguda e crônica, infiltração mieloide associada a tumores e remodelamento tecidual, nos quais alterações no tráfego de neutrófilos podem influenciar a angiogênese e a sinalização do microambiente. Essas características tornam Cxcl1 um alvo útil para dissecar a migração de células imunes inatas e a comunicação cruzada inflamatória em sistemas murinos.
GRO1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Cxcl1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Cxcl1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Cxcl1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Cxcl1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.