GRO1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420697
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- GRO1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico GRO1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GRO1 Anticuerpo (S-19): sc-80516
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
GRO1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420697 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El Cxcl1 de ratón codifica GRO1, una quimiocina CXC secretada que señala principalmente a través de CXCR2 para impulsar la quimiotaxis y la activación de neutrófilos y otras poblaciones mieloides. GRO1 participa en la señalización inmunitaria innata, amplifica las redes de citocinas inflamatorias y contribuye a la activación endotelial y a la extravasación de leucocitos mediante vías vinculadas a NF-κB y MAPK. La expresión desregulada de CXCL1/GRO1 se asocia con daño tisular inflamatorio, alteración de la defensa del huésped y cambios del microambiente relevantes para la infección y la biología del cáncer. En sistemas experimentales, Cxcl1 se utiliza ampliamente para estudiar gradientes de quimiocinas, el tráfico leucocitario y la remodelación impulsada por la inflamación.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO GRO1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cxcl1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cxcl1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cxcl1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GRO1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cxcl1 para la investigación de la señalización de GRO1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Cxcl1 críticos para la función de GRO1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cxcl1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido GRO1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido GRO1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cxcl1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GRO1 (m) y el plásmido HDR GRO1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cxcl1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cxcl1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.