GRB14 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405224-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GRB14O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GRB14 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GRB14 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GRB14. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GRB14 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405224-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GRB14 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405224-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRB14 (proteína 14 ligada ao receptor do fator de crescimento) é uma proteína adaptadora que se liga a receptores tirosina-quinase ativados, com papéis importantes na modulação da sinalização do receptor de insulina e do IGF1R. Ao interagir com sítios de fosforilação do receptor e com efetores a jusante, a GRB14 influencia a atividade das vias PI3K–AKT e MAPK, moldando o metabolismo celular, a proliferação e a regulação por feedback. Alterações na atividade da GRB14 têm sido associadas à desregulação da sinalização da insulina e a fenótipos metabólicos, e seu contexto de sinalização também é relevante para estados celulares impulsionados por fatores de crescimento estudados em biologia do câncer. Como regulador do tipo “scaffold”, a GRB14 oferece um nó acessível para dissecar mecanismos de ajuste de vias e atenuação de sinal em células humanas.
GRB14 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GRB14 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GRB14. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GRB14. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GRB14 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.