granzyme A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403958-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- granzyme AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase granzyme A (h) e o Plasmídeo Double Nickase granzyme A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GZMA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:granzyme A Anticorpo (CB9): sc-56115
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
granzyme A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403958-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
granzyme A Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403958-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O GZMA humano codifica a granzima A, uma protease de serina armazenada nos grânulos de linfócitos citotóxicos e liberada durante a formação da sinapse imunológica para mediar lesão na célula-alvo. A granzima A participa da entrega dependente de perforina e desencadeia programas de morte celular independentes de caspases, associados a dano em DNA de fita simples, disfunção mitocondrial e sinalização inflamatória. Sua atividade se cruza com vias efetoras citotóxicas em células NK e em células T CD8+ e pode modular respostas de citocinas por meio da clivagem de substratos intracelulares. A expressão ou atividade desregulada de GZMA tem sido associada a lesão tecidual mediada pelo sistema imune e a alterações na vigilância imune antitumoral, tornando-o um marcador útil e um ponto funcional relevante em estudos de inflamação e imunologia do câncer.
granzyme A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GZMA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GZMA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GZMA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GZMA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.