GRAMD1A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408934-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GRAMD1AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GRAMD1A (h) e o Plasmídeo Double Nickase GRAMD1A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GRAMD1A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GRAMD1A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408934-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GRAMD1A Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408934-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRAMD1A codifica uma proteína de transferência de lipídios contendo um domínio GRAM, localizada em sítios de contato entre o retículo endoplasmático e a membrana plasmática, onde contribui para o transporte não vesicular de colesterol e para a homeostase dos lipídios de membrana. Ao detectar colesterol acessível e coordenar o movimento de esteróis, a GRAMD1A sustenta a composição da membrana, a competência de sinalização e a comunicação entre organelas, conectando a disponibilidade de lipídios às respostas celulares ao estresse. Esses processos se intersectam com vias que controlam o tráfego de membranas, a adaptação metabólica e microdomínios de sinalização dependentes de colesterol. A desregulação do manejo de colesterol e da biologia dos sítios de contato é frequentemente associada a características cardiometabólicas e à remodelação de membrana em células tumorais, tornando a GRAMD1A um nó útil para estudos mecanísticos de fenótipos impulsionados por lipídios.
GRAMD1A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GRAMD1A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GRAMD1A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GRAMD1A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GRAMD1A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.