GPR91 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-429973-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR91O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GPR91 (m) e o Plasmídeo Double Nickase GPR91 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Sucnr1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR91 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-429973-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR91 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-429973-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene murino **Sucnr1** codifica o **GPR91**, um receptor acoplado à proteína G sensível ao succinato que conecta o estresse metabólico à sinalização inflamatória e vascular. O succinato extracelular produzido durante hipóxia, isquemia ou disfunção mitocondrial pode ativar o GPR91 e acionar vias a jusante, incluindo sinalização mediada por **Gαi/Gαq**, ativação de **MAPK/ERK**, fluxo intracelular de **Ca²⁺** e modulação de **cAMP**, influenciando a produção de citocinas e a comunicação parácrina. A atividade do GPR91 tem sido estudada em contextos como fisiologia renal e respostas a lesão, sinalização angiogênica na retina, inflamação do tecido adiposo e ativação de células imunes, tornando o **Sucnr1** um ponto útil para investigar a regulação imunometabólica. Esses processos são relevantes para modelos experimentais de síndrome metabólica, fibrose e remodelamento tecidual inflamatório, nos quais o acúmulo de succinato funciona como um sinal de comunicação.
GPR91 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Sucnr1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Sucnr1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Sucnr1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Sucnr1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.