非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
GPR43 抗体 (3B3): sc-293202. Western 印迹分析 HeLa 全细胞裂解液中 GPR43 的表达.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
GPR43双切口酶质粒(h): sc-401858-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- GPR43 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- GPR43双切酶质粒（h）和GPR43双切酶质粒（h2）编码针对FFAR2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：GPR43: sc-293202，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GPR43双切口酶质粒(h) | sc-401858-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR43双切口酶质粒(h2) | sc-401858-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 FFAR2 基因编码 GPR43，这是一种能够感知短链脂肪酸的 GPCR，可被乙酸和丙酸激活，主要偶联 Gαi/o 和 Gαq 信号通路。GPR43 调控 cAMP 抑制、依赖 PLC 的钙动员，以及下游与 MAPK 和 NF-κB 相关的程序，从而影响趋化作用、细胞因子释放和与屏障相关的免疫应答。其在髓系细胞谱系和上皮环境中的表达，使 FFAR2 与微生物代谢产物感知以及代谢—炎症串话紧密相连。GPR43 信号失调与白细胞募集改变及炎症表型相关，这些表型与胃肠道炎症、气道炎症和代谢功能障碍等具有相关性。
GPR43 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 FFAR2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FFAR2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏FFAR2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了FFAR2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。