GPR4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403659-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GPR4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GPR4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GPR4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403659-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403659-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPR4 codifica um receptor acoplado à proteína G sensível a prótons, que atua como sensor de pH extracelular, acoplando sinais de um microambiente ácido à sinalização intracelular por segundos mensageiros. Após a ativação, o GPR4 pode acionar as vias Gs e G13 para modular a produção de cAMP e a dinâmica do citoesqueleto dependente de Rho, influenciando a função de barreira endotelial, o tráfego de leucócitos e a expressão de genes inflamatórios. Essa sinalização responsiva ao pH integra-se a processos regulatórios vasculares e imunológicos que frequentemente estão alterados em tecidos associados à hipóxia e à acidose. A atividade desregulada do GPR4 tem sido investigada em relação à inflamação e à disfunção vascular, fornecendo uma ligação mecanística entre a acidez do microambiente e fenótipos celulares relevantes para doenças.
GPR4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GPR4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GPR4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GPR4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GPR4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.