Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
GPR39 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-427882
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- GPR39 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在GPR39基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GPR39 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-427882 | 20 µg | $397.00 |
概述
Gpr39 基因编码 GPR39，这是一种可感知锌离子的 G 蛋白偶联受体（GPCR），参与调控细胞内信号级联反应，从而影响细胞存活、分泌以及炎症状态。在小鼠体系中，GPR39 的活性与 cAMP 和 Ca2+ 依赖性通路及其下游激酶信号的调节相关，进而影响上皮屏障功能、神经元信号传导和代谢稳态。GPR39 信号异常已在代谢功能障碍、胃肠道炎症以及神经行为表型等背景下得到研究，因此可作为进行通路解析的一个有用节点。作为一种将细胞外线索整合并转化为转录与代谢输出的膜受体，GPR39 是在体内及培养细胞中解析 GPCR 驱动网络的一个易于操控的靶点。
GPR39 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Gpr39基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Gpr39基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Gpr39开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使GPR39蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Gpr39缺失的细胞模型，用于GPR39信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 GPR39 功能至关重要的 Gpr39 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Gpr39 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 GPR39 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 GPR39 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Gpr39 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 GPR39 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 GPR39 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Gpr39同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Gpr39靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。