GPR32 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405309-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR32O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GPR32 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GPR32 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GPR32. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR32 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405309-NIC | 20 µg | $410.00 |
O GPR32 humano codifica um receptor órfão acoplado à proteína G, implicado na detecção de mediadores lipídicos pró-resolução e na modulação da magnitude e da duração das respostas inflamatórias. As ligações de sinalização descritas incluem a modulação, mediada por GPCR, de vias de segundos mensageiros e de programas transcricionais a jusante que influenciam o tráfego de leucócitos, a produção de citocinas e os estados funcionais de macrófagos. A atividade do GPR32 tem sido associada a processos imunitários da fase de resolução, intersetando-se com vias que controlam a quimiotaxia, a sobrevivência celular e a homeostase tecidual. A expressão alterada ou o contexto de sinalização do GPR32 têm sido explorados em condições relacionadas com inflamação, tornando-o um alvo útil para estudos mecanísticos de regulação imunitária.
GPR32 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GPR32 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GPR32. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GPR32. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GPR32 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.