GPR20 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407471-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR20O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GPR20 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GPR20 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GPR20. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR20 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407471-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR20 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407471-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPR20 codifica um receptor órfão acoplado à proteína G (GPCR) que é enriquecido no sistema nervoso central e acredita-se que module a sinalização intracelular por meio de proteínas G heterotriméricas e de vias de segundos mensageiros a jusante, como cAMP/PKA e MAPK/ERK. Ao influenciar a transdução de sinal mediada por receptores, o GPR20 pode afetar a comunicação neuronal, programas de diferenciação celular e respostas transcricionais que integram sinais extracelulares. A desregulação da sinalização de GPCRs, incluindo alterações na expressão ou na atividade de receptores órfãos, tem sido investigada no contexto da biologia do neurodesenvolvimento e da neuropsiquiatria, bem como em sistemas mais amplos nos quais redes de GPCRs moldam transições de estados celulares. Como receptor de membrana com anotação limitada de ligantes, o GPR20 é frequentemente estudado por meio de perturbações genéticas para definir a conectividade de vias e funções específicas do contexto.
GPR20 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GPR20 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GPR20. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GPR20. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GPR20 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.