GPR174 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-413678-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR174O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GPR174 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GPR174 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GPR174. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR174 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-413678-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR174 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-413678-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O GPR174 codifica um recetor acoplado à proteína G, expresso de forma proeminente em subpopulações de células imunitárias, onde contribui para a transdução de sinais que molda a ativação de células T, a produção de citocinas e a homeostase imunitária. Como recetor de membrana, o GPR174 interage com proteínas G heterotriméricas para modular vias de segundos mensageiros, como a sinalização cAMP/PKA, e programas transcricionais a jusante que influenciam o estado celular e o tráfego celular. A sinalização desregulada de GPCR em linfócitos é relevante na biologia inflamatória e autoimune, e alterações na atividade do GPR174 têm sido associadas à variação de fenótipos imunitários em estudos genéticos. Assim, o GPR174 constitui um nó útil para investigar o controlo, mediado por recetores, das respostas imunitárias adaptativas e da diferenciação funcional de linfócitos.
GPR174 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GPR174 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GPR174. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GPR174. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GPR174 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.