GPR105 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-431244-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPR105O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GPR105 (m) e o Plasmídeo Double Nickase GPR105 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para P2ry14. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPR105 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-431244-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR105 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-431244-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **P2ry14** de camundongo codifica o receptor acoplado à proteína G **GPR105 (P2Y14)**, um receptor de açúcares nucleotídicos ativado por UDP-açúcares, como a UDP-glicose, e que se acopla predominantemente à sinalização via **Gi**. A ativação do GPR105 pode modular os níveis de **cAMP** e influenciar vias downstream que moldam a quimiotaxia, a produção de citocinas e a ativação da imunidade inata, com funções descritas em células mieloides e em inflamação associada a barreiras. Em sistemas murinos, a atividade de **P2ry14** tem sido relacionada a respostas inflamatórias e à sinalização de estresse metabólico, tornando-o relevante para estudos de inflamação das vias aéreas e do intestino, imunometabolismo do tecido adiposo e processos neuroinflamatórios associados à microglia. Como um GPCR situado na interface entre o metabolismo extracelular de nucleotídeos e a sinalização imune, **P2ry14** é frequentemente usado para investigar a regulação purinérgica da homeostase tecidual e de circuitos inflamatórios relevantes para doenças.
GPR105 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus P2ry14 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de P2ry14. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função P2ry14. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com P2ry14 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.